福建檢驗檢疫局日前發(fā)布消息稱，該局自主研發(fā)“轉基因大豆2704-12(品系)的LAMP檢測引物及方法”獲國家發(fā)明專利授權。這是福建檢驗檢疫局自主研發(fā)的轉基因檢測領域首個專利。目前，這項技術已作為檢驗檢疫行業(yè)標準(SN/T 3767.15-2014)，在國內轉基因大豆檢測中進行推廣應用。
據福建檢驗檢疫局相關專家介紹，轉基因大豆2704-12品系是國家農業(yè)部批準允許進口的，進口時必須開展符合性驗證檢測的一種品系。國內外還未見轉基因大豆A2704-12品系LAMP檢測引物及方法的報道。此次福建檢驗檢疫局自主研發(fā)的轉基因大豆檢測方法，首次設計、篩選到了轉基因大豆A2704-12品系的LAMP檢測引物，并建立普遍適用于基層實驗室的轉基因大豆A2704-12品系LAMP檢測方法。
該方法具有高效、簡便、高特異性等優(yōu)勢。一是高效。LAMP方法只需要恒溫就能完成擴增反應，沒有PCR反應中那樣循環(huán)溫模板的變性、退火、復性過程，因此可將PCR法的2-3小時的擴增時間縮短至約1小時，即能擴增出109～1010倍靶序列拷貝，DNA產量高達500ug/mL，且能檢測到的拷貝數低至PCR檢測限的1/10。二是簡便。因LAMP的恒溫擴增和產物直觀檢測的特點使其只需要一個簡單的恒溫器，無需昂貴的檢測設備，有利于對現場檢測或基層實驗室推廣應用。三是高特異性。采用六個區(qū)段、六條引物對靶DNA序列進行擴增，決定了LAMP法的特異性高于只用1對引物進行擴增的PCR法。
據悉，目前檢測轉基因特異品系的方法主要有普通PCR方法和實時熒光定量PCR方法。普通PCR方法耗時長，操作繁瑣，靈敏度不夠，容易產交叉污染，質控復雜，假陽性、假陰性比例偏高。實時熒光定量PCR方法靈敏度高，但成本昂貴，技術要求高，且必須使用大型儀器設備。
此次福建運用LAMP這種新穎的恒溫核酸擴增方法，在轉基因特異品系檢測領域有效建立了普遍適用于檢驗檢疫一線基層實驗室的快速、簡便、高效的轉基因品系檢測方法，檢測成本遠低于熒光定量PCR。
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